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紫外可見分光光光度計的使用

更新時間:2025-11-10      點擊次數(shù):562
紫外可見分光光度計的使用方法如下:  
一、使用前準(zhǔn)備  
環(huán)境要求  
放置在穩(wěn)定、無振動的工作臺上,避免陽光直射、氣流干擾及強(qiáng)電磁場。  
溫度控制在10-35℃,濕度≤65%,遠(yuǎn)離腐蝕性氣體和灰塵。  
儀器檢查  
確認(rèn)電源穩(wěn)定,接地良好,避免電壓波動或漏電。  
檢查樣品室是否清潔,無遮擋物或殘留液體。  
比色皿準(zhǔn)備  
材質(zhì)選擇:紫外區(qū)(200-360nm)使用石英比色皿,可見區(qū)(360-800nm)可用玻璃比色皿。  
清洗:用蒸餾水或無水乙醇沖洗,避免指紋或劃痕,晾干后備用。  
潤洗:裝樣前用待測溶液潤洗2-3次,減少殘留干擾。  
二、操作步驟  
開機(jī)預(yù)熱  
打開電源開關(guān),預(yù)熱20-30分鐘,使光源和檢測系統(tǒng)穩(wěn)定。  
新型號儀器可能具備自動校準(zhǔn)功能,預(yù)熱后自動完成;舊型號需手動校準(zhǔn)(如調(diào)零、調(diào)100%T)。  
波長設(shè)置  
根據(jù)實驗需求,通過旋鈕或數(shù)字鍵輸入目標(biāo)波長(如最大吸收波長λmax)。  
確認(rèn)波長顯示穩(wěn)定后再進(jìn)行下一步操作。  
校準(zhǔn)(基線調(diào)整)  
調(diào)零(0%T/A=0):將參比溶液(空白溶液)裝入比色皿,放入樣品室參比池,關(guān)閉蓋子,按“調(diào)零”鍵。  
調(diào)100%T(A=0):將樣品室空置或放入純?nèi)軇┍壬螅?ldquo;調(diào)100%T”鍵。  
注意:校準(zhǔn)順序可能因儀器型號而異,需參考說明書。  
樣品測量  
將待測樣品裝入比色皾,放入樣品池,關(guān)閉蓋子。  
待讀數(shù)穩(wěn)定后記錄吸光度(A)或透光率(T)。  
若需多波長測量,重復(fù)調(diào)整波長并記錄數(shù)據(jù)。  
數(shù)據(jù)處理  
定量分析:根據(jù)比爾-朗伯定律(A=εbc),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算濃度。  
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:測量已知濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度,擬合濃度-吸光度曲線。  
樣品測定:測量未知樣品吸光度,代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度。  
定性分析:比較樣品與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的吸收光譜特征(如λmax、ε)。  
三、使用后維護(hù)  
關(guān)機(jī)流程  
取出比色皿,用蒸餾水沖洗干凈,晾干后入盒保存。  
關(guān)閉電源,拔下插頭,在樣品室內(nèi)放置干燥劑,蓋上防塵罩。  
日常保養(yǎng)  
比色皿清洗:若內(nèi)壁有顏色掛壁,可用無水乙醇浸泡后清洗。  
儀器清潔:定期用軟布擦拭外殼,避免使用腐蝕性清潔劑。  
干燥劑更換:每半個月檢查干燥劑顏色,變色時及時更換。  
光源維護(hù):氘燈壽命約1000-2000小時,鎢燈約2000小時,需定期更換。  
長期存放  
存放于干燥、避光、通風(fēng)的環(huán)境中,避免溫度驟變。  
定期通電運行,防止電子元件受潮。  
四、注意事項  
操作規(guī)范  
避免液體灑入儀器內(nèi)部,若不慎灑入,立即斷電并聯(lián)系維修。  
測量時輕關(guān)樣品室蓋,避免震動影響讀數(shù)穩(wěn)定性。  
吸光度值建議控制在0.2-0.8之間,超出時需稀釋樣品。  
安全防護(hù)  
紫外光可能對眼睛和皮膚造成傷害,操作時避免直視光源。  
使用腐蝕性或有毒試劑時,佩戴防護(hù)手套和護(hù)目鏡。  
故障排查  
讀數(shù)不穩(wěn)定:檢查環(huán)境濕度、電源穩(wěn)定性、比色皿是否匹配。  
無法調(diào)零:確認(rèn)光門是否關(guān)閉,或光源是否老化。  
透光率異常:檢查比色皿是否污染,或光路是否偏移。
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